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重组胰蛋白酶(RTrypsin)说明书
来源: | 作者:proaaeda7 | 发布时间: 2019-03-07 | 3172 次浏览 | 分享到:
胰蛋白酶(Trypsin; EC 3.4.21.4)是一种丝氨酸蛋白酶,酶解赖氨酸及精氨酸C末端形成的肽键。重组猪胰蛋白酶是由重组毕赤酵母表达并采用层析色谱法纯化获得。氨基酸序列与猪胰腺来源的阳离子型胰蛋白酶完全一致,分子量为24kD,最适pH为7-9。可替代猪胰腺来源胰蛋白酶应用于各种生物技术过程中,如:重组胰岛素生产;细胞培养、细胞发酵;蛋白质的酶解、测序;各种组织的细胞分离等。活性受丝氨酸蛋白酶抑制剂如TLCK、PMSF等的抑制,金属离子螯合剂如EDTA等抑制酶活。

重组胰蛋白酶(RTrypsin)说明书


货号

名称

规格

RTP0102

RTrypsin

10mg

RTP0103

RTrypsin

1mg

RTP0104

RTrypsin

10μg

 

1、产品简介

胰蛋白酶(Trypsin; EC 3.4.21.4)是一种丝氨酸蛋白酶,酶解赖氨酸及精氨酸C末端形成的肽键。重组猪胰蛋白酶是由重组毕赤酵母表达并采用层析色谱法纯化获得。氨基酸序列与猪胰腺来源的阳离子型胰蛋白酶完全一致,分子量为24kD,最适pH7-9可替代猪胰腺来源胰蛋白酶应用于各种生物技术过程中,如:重组胰岛素生产;细胞培养、细胞发酵;蛋白质的酶解、测序;各种组织的细胞分离等。活性受丝氨酸蛋白酶抑制剂如TLCKPMSF等的抑制,金属离子螯合剂如EDTA等抑制酶活。

 

2、产品特性

检验项目

标准规定

性状

白色或类白色冻干粉

蛋白含量

≥10%固体干重

电泳纯度

主带纯度≥95%

相对分子量

23kDa±2.3kDa

酶比活性

3800USP/mg

标示量为分装规格,货号标示常备规格,可依据客户需求定制更大规格包装。

CoA指标,可依据客户定制需求,出具细菌内毒素,微生物限度,宿主蛋白残留,宿主DNA残留等指标检测报告,并制定相应质量标准。

 

3、推荐使用方法

溶解缓冲:10mmol/L HCl20mmol/L CaCl2;溶解后分装-15℃以下保存。

酶切缓冲25 mmol/L Tris-HCl , pH 7.6~8.0

推荐比例:蛋白酶:融合蛋白质量比1:20~1:100(肽图或蛋白组学研究)1:200~1:2000(多肽/蛋白生产工艺)

 

 

 

4、保存条件

储存稳定性:冻干粉存于-15以下,24个月稳定;10mmol/L HCl20mmol/L CaCl2溶解后分装储存于-15以下,反复冻融5次,无活性损失;溶解后2~8保存建议不超过7d

运输稳定性:冰袋保温运输,活性稳定。

 

5、应用实例

RTrypsin特异性酶切合成短肽

合成多肽序列YGKRLWK,理论酶切位点酶切产物YGKRLWKYGKRRLWK,蛋白酶:合成多肽质量比1:10037℃酶切反应10minLC-MS验证酶切反应特异性。




Peak#

R.T.

M.W.

Sequence

Peak 1

6.70min

366.42

YGK

Peak 2

7.61min

552.60

YGKR

Peak 3

17.67min

445.56

LWK

Peak 4

19.53min

601.75

RLWK

Peak 5

19.97min

950.15

YGKRLWK

 

6、产品优势及用途

a. 批量生产规模可达100g,连续批次生产质量稳定,批间无差异。

b. 高纯度,高比活性;重组表达生产,无外源性病毒污染,生产过程不使用动物来源原料;与动物来源猪胰蛋白酶酶学性质相同,可替代猪胰腺来源胰蛋白酶应用于重组胰岛素生产,细胞发酵、培养,组织细胞分离,蛋白质的酶解等多领域。

c. 配套服务完善,可提供特异性相同,高酶活保留,耐压性能优良可循环多次使用的固相化胰蛋白酶用于蛋白序列分析及工业化生产,反应体系中不残留RTrypsin蛋白酶;相关技术服务齐全,提供生产工艺控制RTrypsin蛋白酶微量残留检测试剂盒。