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重庆艾美迪生物科技有限公司
重组双碱性内肽酶(RKex2)说明书
来源: | 作者:proaaeda7 | 发布时间: 2019-03-07 | 913 次浏览 | 分享到:
Kex-2(E.C.3.4.21.61)属于枯草杆菌蛋白酶家族,为酵母自身编码的一种前体加工酶,Ca2+依赖型丝氨酸蛋白酶,能够专一性地识别和切割Lys-Arg,Arg-Arg,Pro-Arg等双碱性氨基酸的羧基端肽键,不同于Trypsin,该酶不能识别和切割单一碱性氨基酸即Arg或Lys的羧基端肽键。常在酵母表达外源蛋白前体中加入Kex-2识别位点,便于外源蛋白前体加工。该酶最适pH为9.0,在偏酸性环境中稳定,稳定pH为5.0-6.0。最适温度为37℃,酶活性不受常规丝氨酸蛋白酶抑制剂(如PMSF、TPCK等)抑制。

重组双碱性氨基酸内肽酶(RKex2)说明书


货号

名称

规格

RKex20202

RKex2

10mg

RKex20203

RKex2

1mg

RKex20204

RKex2

10μg


1
、产品简介

Kex-2E.C.3.4.21.61)属于枯草杆菌蛋白酶家族,为酵母自身编码的一种前体加工酶,Ca2+依赖型丝氨酸蛋白酶,能够专一性地识别和切割Lys-ArgArg-ArgPro-Arg等双碱性氨基酸的羧基端肽键,不同于Trypsin,该酶不能识别和切割单一碱性氨基酸即ArgLys的羧基端肽键。常在酵母表达外源蛋白前体中加入Kex-2识别位点,便于外源蛋白前体加工。该酶最适pH9.0,在偏酸性环境中稳定,稳定pH5.0-6.0。最适温度为37,酶活性不受常规丝氨酸蛋白酶抑制剂(如PMSFTPCK等)抑制。

2、产品特性

检验项目

标准规定

性状

白色或类白色冻干粉

含量

标示量的80%~120%

电泳纯度

≥90%

相对分子量

80kDa±12kDa

酶比活性

≥10U/mg

标示量为分装规格,货号标示常备规格,可依据客户需求定制更大规格包装。

CoA指标,可依据客户定制需求,出具细菌内毒素,微生物限度,宿主蛋白残留,宿主DNA残留等指标检测报告,并制定相应质量标准。

 

3、推荐使用方法

溶解缓冲:20mmol/L NaAc-HAc2mmol/L Ca2+pH 5.0~5.5

酶切缓冲:50~100mmol/L Tris2mmol/L  Ca2+pH 7.0~9.0;HEPES5mmol/L  Ca2+pH 7.0~9.0

推荐比例:蛋白酶:融合蛋白质量比1:20~1:1000

 

4、保存条件

储存稳定性:冻干粉存于-15以下,24个月稳定;20mmol/L NaAc-HAc2mmol/L Ca2+pH 5.0~5.5溶解后分装储存于-15以下,避免反复冻融;溶解后2~8保存建议不超过24h

运输稳定性:冰袋保温运输,活性稳定。

 

5、应用实例

RKex2特异性酶切合成短肽

合成多肽序列YGKRLWK,理论酶切位点酶切产物YGKRLWK,蛋白酶:合成多肽质量比1:100037酶切反应10minLC-MS验证酶切反应特异性。

 

Peak#

R.T.

M.W.

Sequence

Peak 1

2.79min

522.60

YGKR

Peak 2

6.26min

445.56

LWK

Peak 3

6.94min

950.15

YGKRLWK

 

6、产品优势

a. 定制规模制备生产,单批次产量可达50g以上,连续批次生产质量稳定,批间无差异。

b. 高纯度,高比活性,无外源性病毒污染,无动物源生产原料。

c. 配套服务齐全,可提供生产工艺质量控制RKex2蛋白酶微量残留检测ELISA试剂盒。