Kex-2(E.C.3.4.21.61)属于枯草杆菌蛋白酶家族,为酵母自身编码的一种前体加工酶,Ca2+依赖型丝氨酸蛋白酶,能够专一性地识别和切割Lys-Arg,Arg-Arg,Pro-Arg等双碱性氨基酸的羧基端肽键,不同于Trypsin,该酶不能识别和切割单一碱性氨基酸即Arg或Lys的羧基端肽键。常在酵母表达外源蛋白前体中加入Kex-2识别位点,便于外源蛋白前体加工。该酶最适pH为9.0,在偏酸性环境中稳定,稳定pH为5.0-6.0。最适温度为37℃,酶活性不受常规丝氨酸蛋白酶抑制剂(如PMSF、TPCK等)抑制。
货号
|
名称
|
规格
|
RKex20202
|
RKex2
|
10mg
|
RKex20203
|
RKex2
|
1mg
|
RKex20204
|
RKex2
|
10μg
|
1、产品简介
Kex-2(E.C.3.4.21.61)属于枯草杆菌蛋白酶家族,为酵母自身编码的一种前体加工酶,Ca2+依赖型丝氨酸蛋白酶,能够专一性地识别和切割Lys-Arg,Arg-Arg,Pro-Arg等双碱性氨基酸的羧基端肽键,不同于Trypsin,该酶不能识别和切割单一碱性氨基酸即Arg或Lys的羧基端肽键。常在酵母表达外源蛋白前体中加入Kex-2识别位点,便于外源蛋白前体加工。该酶最适pH为9.0,在偏酸性环境中稳定,稳定pH为5.0-6.0。最适温度为37℃,酶活性不受常规丝氨酸蛋白酶抑制剂(如PMSF、TPCK等)抑制。
2、产品特性
检验项目
|
标准规定
|
性状
|
白色或类白色冻干粉
|
含量
|
标示量的80%~120%
|
电泳纯度
|
≥90%
|
相对分子量
|
80kDa±12kDa
|
酶比活性
|
≥10U/mg
|
①标示量为分装规格,货号标示常备规格,可依据客户需求定制更大规格包装。
② CoA指标,可依据客户定制需求,出具细菌内毒素,微生物限度,宿主蛋白残留,宿主DNA残留等指标检测报告,并制定相应质量标准。
3、推荐使用方法
溶解缓冲:20mmol/L NaAc-HAc,2mmol/L Ca2+,pH 5.0~5.5。
酶切缓冲:50~100mmol/L Tris,2mmol/L Ca2+,pH 7.0~9.0;或HEPES,5mmol/L Ca2+,pH 7.0~9.0;
推荐比例:蛋白酶:融合蛋白质量比1:20~1:1000
4、保存条件
储存稳定性:冻干粉存于-15℃以下,24个月稳定;20mmol/L NaAc-HAc,2mmol/L Ca2+,pH 5.0~5.5溶解后分装储存于-15℃以下,避免反复冻融;溶解后2~8℃保存建议不超过24h。
运输稳定性:冰袋保温运输,活性稳定。
5、应用实例
RKex2特异性酶切合成短肽
合成多肽序列YGKRLWK,理论酶切位点酶切产物YGKR及LWK,蛋白酶:合成多肽质量比1:1000,37℃酶切反应10min,LC-MS验证酶切反应特异性。
Peak#
|
R.T.
|
M.W.
|
Sequence
|
Peak 1
|
2.79min
|
522.60
|
YGKR
|
Peak 2
|
6.26min
|
445.56
|
LWK
|
Peak 3
|
6.94min
|
950.15
|
YGKRLWK
|
6、产品优势
a. 定制规模制备生产,单批次产量可达50g以上,连续批次生产质量稳定,批间无差异。
b. 高纯度,高比活性,无外源性病毒污染,无动物源生产原料。
c. 配套服务齐全,可提供生产工艺质量控制RKex2蛋白酶微量残留检测ELISA试剂盒。