重组肠激酶说明书
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作者:proaaeda7
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发布时间: 2018-09-07
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肠激酶（Enterokinase，EC3.4.21.9）是一种高度专一性识Asp-Asp-Asp-Asp-Lys序列的蛋白酶，在Lys的C端水解多肽。它可以将胰蛋白酶原转变为胰酶，也可以将带有这个识别序列的融合蛋白切开。由于肠激酶具有高度专一性，水解效率高的特点......
重组肠激酶（EK）说明书
重庆艾美迪生物科技有限公司
1.产品简介
肠激酶（Enterokinase，EC3.4.21.9）是一种高度专一性识Asp-Asp-Asp-Asp-Lys序列的蛋白酶，在Lys的C端水解多肽。它可以将胰蛋白酶原转变为胰酶，也可以将带有这个识别序列的融合蛋白切开。由于肠激酶具有高度专一性，水解效率高的特点，它被广泛地应用于基因工程产品的开发，其应用之一是作为工具蛋白酶用于重组融合蛋白质的特异性断裂，尤其适用于生物工程制药业及基因工程、生物化学、分子生物学等研究。本重组表达产品携带his标签，便于切割目标蛋白后除去，保证酶切的可控性和特异性。
本产品为采用重组酵母分泌表达的高纯度、高活性的重组猪源肠激酶，适用范围广（4-45℃，pH4.5-9.5），并且在各种去垢剂和变性剂存在的条件下仍具有部分活性。
2.产品特性
项目
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信息
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来源
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毕赤酵母重组表达
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性状
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白色粉末
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组分
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50mmol/L Tris-HCl，50%甘油，pH 8.0
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电泳分子量
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44.0±4.4kDa
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PRLC纯度
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≥95%
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比活性
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≥10000AU/mg
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蛋白含量
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10mg/支
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3.应用实例
E.coli表达重组人甲状旁腺激素-麦芽糖结合蛋白（MBP-PTH）融合蛋白，以EK酶：融合蛋白质量比1:250，25℃酶切8hr后，HPLC检测如图，酶切产物为MBP与PTH，经质谱鉴定分子量正确。
图1 HPLC检测PTH-MBP融合蛋白 图2 HPLC检测EK酶切产物
4.质量参数
4.1 电泳分子量&液相纯度
图3.EK SDS-PAGE分子量检测 图4. EK RP-HPLC纯度检测
4.2 酶活单位定义
在25℃，pH 8.0条件下，1min激活1nmol/L 胰蛋白酶原需要的酶量定义为一个酶活单位。
5.保存条件
本品冻干粉保存与-15℃以下，溶解后可保存于2~8℃或分装保存于-15℃，避免多次冻融。
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